P26 | Valutazione dell'attività anti-listeria in vitro e in situ di un estratto etanolico di propoli proveniente dalla tunisia

Scopo del presente studio è stato quello di valutare l’attività anti-Listeria di un estratto etanolico di propoli (EEP) proveniente dalla Tunisia, sia in vitro che in situ in ricotta zuccherata mediante challenge test, indagando nel contempo se un’eventuale attività antimicrobica sia in grado di prolungarne la shelf-life senza alterarne le caratteristiche sensoriali. L'estratto etanolico, ottenuto dalla propoli grezza raccolta da alveari di Apis mellifera, veniva preparato in un rapporto di 20% di propoli e 80% di solvente (Etanolo 80%) (p/v). L'attività antibatterica dell'EEP veniva analizzata in vitro con il metodo di Disk Diffusion Assay (1 g/ml; 250 mg/ml; 150 mg/ml) valutando, inoltre, la minima concentrazione battericida (MBC) e inibente (MIC) da 25 a 0,0125 mg/ml contro n. 6 ceppi di Listeria monocyotogens (ATCC 19111; 19112; 7644 + tre ceppi della linee guida EURL per prodotti lattiero caseari 12MOB098LM, 12MOB096LM e 12MOB079LM). La valutazione in situ è stata condotta su n. 2 tipologie di ricotta zuccherata: una industriale vaccina (RZIV) e la seconda semi-artigianale di pecora (RZSP) del commercio, entrambe addizionate in laboratorio con 40% di saccarosio. Ogni tipologia di ricotta zuccherata veniva suddivisa in 2 aliquote: dalla prima, destinata al challenge test, venivano ottenute più sub-aliquote, contaminate sperimentalmente con un mix dei n. 3 ceppi di L. monocytogenes (12MOB098LM, 12MOB096LM e 12MOB079LM) e trattate con concentrazioni differenti di EEP (0, 0,1 e 1%). La seconda aliquota, suddivisa a sua volta in più sub-aliquote, veniva addizionata con 0 e 0,1 % di EEP per la RZIV e 0 e 1% di EEP per la RZSP, e analizzati ad intervalli regolari per la valutazione sensoriale e per la shelf-life analizzando i seguenti parametri microbiologici: Carica batterica totale (CBT,), Enterobacteriaceae, Pseudomonas spp. e batteri lattici. I risultati del Disk Diffusion Assay mostravano una buona attività antibatterica dell’EEP contro tutti i ceppi di L. monocytogenes per tutte le concentrazioni saggiate. La MIC ottenuta per L. monocytogenes variava da 0,25 per i ceppi ATCC a 0,625 mg/ml per i tre ceppi EURL, mentre, la MBC era la stessa della MIC per due dei tre ceppi EURL e 1,25 mg/ml per tutti gli altri ceppi. Per quanto riguarda il challenge test, dopo 14 giorni nella RZIV veniva osservata una differenza significativa nella crescita di L. monocytogenes tra il Δ del campione controllo (+6,10 log CFU/g) e del campione trattato con 1% EEP (+ 3,84 log CFU/g). Nella RZSP, veniva osservata una minore crescita del patogeno, con un Δ del campione di controllo (+ 2,78 log CFU/g) e dei campioni trattati con l'1% di EEP (+ 1,04 log CFU/g). Relativamente all’influenza sulla shelf-life, solo nei campioni RZSP trattati con l’1% di EEP si osservano differenze sia per la CBT (- 1,25 log UFC/g) che per i batteri lattici (- 0,81 log UFC/g); Infine, nei campioni trattati con l’1% si osservava una diminuzione nel tempo dell’impatto sensoriale. I risultati del presente studio hanno messo in evidenza come l’EEP possegga una discreta attività anti L. monocytogenes, mostrando risultati promettenti anche nella ricotta zuccherata trattata con l’1% di EEP. Gli estratti di popoli potrebbero quindi rappresentare una valida alternativa naturale ai comuni additivi e trattamenti utilizzati a livello industriale per la gestione del rischio di tale patogeno.